爱思益普建立了完善的靶点验证和方法学构建开发平台,助力基于新靶点的研究和化合物筛选。 对于全新靶点,爱思益普建立了从头合成的蛋白表达能力,结合SPR(Biacore 8K等)平台,提供完整的新靶点验证筛选能力。
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1. 蛋白纯化
• 蛋白表达系统(E.coli, Sf9昆虫细胞,哺乳动物细胞)
• 蛋白标签(His, GST, FLAG, Avi, MBP, Fc-fusion)
• 蛋白鉴定(SDS Page, Brandford test, LC-MS analysis, Activity test)
2.酶学研究
• 结合试验(HTRF, Alpha ), ADP 定量 (ADP-Glo, etc.)
• 磷酸化底物检测 (Ulight, HTRF, Lantha, Alpha)
• 细胞磷酸化蛋白检测(AlphaScreen, HCS, WB)
• 激酶, 表观遗传酶学, E3. DUBs, 磷酸酶, 蛋白酶, 解旋酶, 核酸酶
3.细胞系工程
• 建立了超过1000 株细胞株
• 报告基因,突变, 标签和无标签表达
• 过表达稳转细胞株 (Flip-In, lentiviral and Retroviral system, Neon electroporation, T-REx system, HiBiT and PPI systems etc.)
• 敲出 (KO) 和敲入 (KI) :CRISPR/Cas 9 system, siRNA, shRNA
4.离子通道
• 基于荧光功能筛选 (FLIPR)
• 电生理实验(手动膜片钳和自动膜片钳QpatchII)
• Panel screening (100+ targets validated)
5.GPCR
• GPCR 稳转细胞系构建
• cAMP(HTRF; agonist/antagonist, CRE-BLA/Fluc)
• 钙流(Flipr; IP-one, NFAT-Luc)
• β-arrestin((PPI/NanoBRET)
• Panel screening (100+ targets validated)
6.核受体
• 荧光偏振结合试验 (lantha)
• 基于TaqMan的基因表达
• 报告基因筛选(transient transfection, stable cell line)
• Panel screening (30+ nuclear receptors)
7.免疫-肿瘤靶点研究
• 检查点阻断生化结合试验和细胞报告基因试验
• 共培养报告基因试验
• 全血, PBMC, T cell, Tregs, DC, B and NK cellular assays
• 体外实验 MLR, co-culture, etc
• 细胞因子释放试验FACS, ELISA
8.Panel screening
• Safety panel (47个/90个靶点)
• 激酶谱 >400 assays validated (provide 207 and 310 panel screening)
• 其他panels: TK family (76x), CDK family (16x) and Mini kinase (60x)
• 定制激酶谱
• 体外脱靶效应筛选(基于不同疾病靶点)
• GLP hERG/心脏安全研究
• Cell panel screening