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细胞以精确和协调的方式处理不同类型的压力情况的能力是生存的关键,涉及各种信号网络。在过去的25年中,p38激酶(尤其是p38α)在许多水平上与细胞对压力的反应有关。这些范围从环境和细胞内应激(如高渗性、氧化应激或 DNA 损伤)到涉及重要细胞变化(如分化)的生理情况。鉴于p38α控制着多种功能,该途径的失调与炎症、免疫紊乱或癌症等疾病有关,这表明靶向p38α可能具有治疗意义。这种信号通路的组织,p38α底物的多样性、它们的机制以及它们与特定细胞功能的联系。
p38 MAPK(α、β、γ 和 δ)是MAPK家族的成员,各种环境应激和炎症细胞因子均可将其激活。对于其他MAPK级联,膜近端组分是一个 MAPKKK,其为典型的 MEKK 或混合性谱系激酶 (MLK)。MAPKKK 磷酸化并激活 MKK3/6,后者即是 p38 MAPK 激酶。MKK3/6 也可在凋亡因素的刺激下直接由 ASK1 激活。p38 MAPK参与调节HSP27、MAPKAPK-2 (MK2)、MAPKAPK-3(MK3)和其他几种转录因子,包括ATF-2、Stat1、Max/Myc复合体、MEF-2和Elk-1,而CREB通过激活MSK1间接调控。我们可以通过检测pMK2活性检测化合物对该通路的抑制情况进而分析评价药物在p38通路的抑制效果。
爱思益普拥有LI-COR公司的OdysseyDLx双色红外荧光成像平台,可在细胞微孔板中进行In cell western assay(ICW)分析,结合了Western Blot的特异性和ELISA的可重复性和高通量。可直接检测细胞内蛋白水平,磷酸化水平,蛋白质降解,受体活化水平等。
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