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来源:2025-02-25 16:22:01
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Vav家族是一组信号转导蛋白, 在脊椎动物中,该家族由三个成员组成——Vav1、Vav2,Vav3。Vav1主要在人造血干细胞编码表达GEF,包括T细胞、B细胞、单核细胞、自然杀伤(NK)细胞、粒细胞和树突状细胞,Vav1的多结构域结构对其激活和功能至关重要。其中Vav1在TCR介导的活化和T细胞效应功能中的关键作用。通过CRISPR screening方法发现,VAV1在基因组中的缺失将会具体影响:Jurkat细胞中TCR介导的活化,如影响一种经典的淋巴细胞活化标志物CD69的上调,以及TCR介导的细胞因子分泌,如IL-2和IFN-γ,还与TCR介导的细胞增殖相关。此外Vav1还在GEF非依赖通路中作为支架蛋白发挥作用,在GEF依赖通路中发挥催化作用(主要激活Rac GTPases)。
HiBiT(Highly Insensitive Bioluminescent Tag)是一种基于蛋白质互补的生物发光检测方法,可用于蛋白质质量、定量、降解、内化等研究。HiBiT是一种11个氨基酸的肽标签,可以连接到任何目的蛋白(POI),并与LgBiT(18 kDa)具有很强的亲和力,可自发互补结合,形成具有催化活性的NanoBiT®酶,在底物存在的情况下,可产生明亮的发光信号。在很宽的动态范围内,发光信号强度与HiBiT蛋白标签含量成正比,操作简单,灵敏度高。
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