激酶药物在治疗过程中暴露出至关重要的问题是激酶选择性差的问题，因此在激酶抑制剂的改造前期，会增加激酶谱筛选来确定激酶体外的选择性。激酶谱分析旨在了解先导化合物的一般选择性趋势，这有助于靶标选择、化合物优先级和毒性的潜在影响。在目前的药物发现过程中，针对激酶以及突变体的激酶谱筛选化合物已成为标准的方法。激酶抑制剂具有同时抑制多个靶点的能力。

目前激酶谱筛选的方法介绍：

Z’-LYTE Assay

Z’-LYTE assay基于荧光共振能量转移（FRET）的方法，不需要昂贵的放射性或抗体试剂。在多肽底物的两端分别标记了发射的供体荧光分子（香豆素）和受体荧光分子（荧光素）。在多肽底物上加上磷酸基团，特异性蛋白酶识别并切割非磷酸化的多肽底物，导致荧光共轭能量转移不再发生。而未切割的磷酸化多肽维持荧光共轭转移。使用比率法计算用于定量反应进程。比率法减少了孔间FRET肽浓度和信号强度的变化，使得读值稳定。

Z’-LYTE assay需要合成荧光基团标记的多肽底物，可以实现化合物的快速检测开发，得到的检测结果稳定并可重复。此方法通过小型化试验来节省试剂和资金，若化合物本身有蛋白水解酶的抑制作用，可能会导致假阳性。

Mobility Shift Assay

迁移率偏移测定通过测量激酶反应中的非磷酸化和磷酸化底物直接监测磷酸化。根据选择的靶激酶评估化合物的效力和选择性。激酶反应后，部分底物被激酶加上磷酸基团成为产物，带有荧光标记的多肽底物和反应产物之间相差3个电荷，当进入毛细管电泳后，由于两者所携带的电荷不同而达到分离。

当运行基于芯片的高通量筛选(HTS)方法分离荧光标记的多肽底物和反应产物，必须考虑为后续分析设置不同的抑制截止点，以避免失去太多潜在的靶点。同样，在命中识别和确认方面存在30%的差异，这对使用该方法进行分析工作构成了很大的挑战，特别是对于具有溶解度问题的化合物。

传统的激酶抑制剂分析是一种低通量方法，测定小分子化合物降低激酶磷 酸化活性的能力（IC50）或其与激酶的结合亲和力（解离常数），但通常这种测 量不会扩展到给定化合物对整个激酶组的抑制能力。

激酶谱筛选是一组具有不同蛋白组成的进行化合物测试。目前高通量筛选已经成为药物研发的重要工具。激酶谱筛选可以为研究者提供快捷明确的结果展示。第一，激酶谱筛选可以在药物研究的早期阶段为研究者提供明确的有作用的靶点。第二，激酶谱筛选可以用来研究化合物的选择性。

激酶谱筛选的优势：

l提供激酶谱定制服务

l功能性筛选。

l所有靶点均为人源靶点。

l周周安排检测。

l提供中英文报告，可视化结果展示，全面支持中美IND申报。

l更好的售后服务体验，根据客户投稿要求进行展示图的格式修改。

推出的激酶谱类型：

lCDK激酶谱

lTK酪氨酸激酶谱

l80核心野生型激酶谱

l217野生型激酶谱

l330野生型激酶谱

l416全激酶谱

l定制谱

验证数据展示：

图1 Kinase Panel 416激酶谱树图展示