靶向分子马达：Kinesin家族化合物的创新筛选策略

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靶向分子马达：Kinesin家族化合物的创新筛选策略

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Kinesin家族蛋白是细胞内运输的主要执行者，它们利用ATP水解产生的能量，在微管上进行定向运动，运输细胞器和分子货物。Kinesin家族包含多个亚家族，根据其氨基酸序列和结构差异被分为14个不同的类别，即Kinesin-1至Kinesin-14 。这些蛋白在细胞中扮演着多种角色，包括但不限于：细胞器和分子货物的运输；细胞分裂过程中的染色体分离；微管网络的动态调控；纤毛和鞭毛的形成与功能。

图1 Kinesin家族分类

KIF18A（Kinesin Family Member 18A）是一种属于Kinesin家族的蛋白质，是Kinesin-3亚家族的成员，具有典型的Kinesin结构，包括一个重链和一个轻链，重链包含一个运动头部和一个尾部，尾部通常与细胞内的货物结合。它在细胞分裂过程中发挥着重要作用，特别是在有丝分裂期间帮助染色体的正确聚集和对齐。KIF18A的功能在正常的整倍体细胞分裂中并非必需，但在具有高染色体不稳定性的非整倍体癌细胞亚群中却是必需的。在这些癌细胞中，KIF18A的敲低会导致有丝分裂停滞、细胞停滞和细胞死亡，因此KIF18A是一个有吸引力的抗癌靶点。

图2 KIF18A蛋白结构域组成

一、产品及服务

1. Kinesin蛋白库：

人源MCAK (KIF2C) 蛋白，人源KHC (KIF5A) 蛋白，人源KIF7蛋白，人源CENP-E (KIF10) 蛋白，人源Eg5 (KIF11) 蛋白，人源KIF18A蛋白，人源KIF18B 蛋白，人源KIF19A蛋白，人源MKLP2 (KIF20A) 蛋白，人源KIF22 蛋白，人源MKLP1 (KIF23) 蛋白。

2. 抑制剂筛选：ADP-Glo实验。

二、实验原理

Kinesin ATPase实验原理见图3, Kinesin沿着微管蛋白运动需要消耗ATP转化成ADP，使用ADP-Glo试剂盒检测ADP的生成量来反应Kinesin ATPase酶活，加入ADP-Glo试剂盒中的ADP-Glo Reagent可以将实验中未反应的ATP全部清除，加入ADP-Glo试剂盒中的ADP-Glo Detection会将实验中产生的ADP转化为ATP，并且里面含有荧光素酶的底物，最后使用酶标仪的化学发光模块检测信号值。