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白介素-1受体相关激酶4(IRAK-4)是参与机体先天性免疫反应过程中的关键分子。它与另外3个成员IRAK-1、IRAK-2、IRAK-3(IRAK-M)同属于细胞内丝氨酸-苏氨酸激酶IRAK家族。IRAK家族成员都有一个含丝氨酸和苏氨酸的激酶结构域和保守的死亡结构域,除IRAK-4之外,其他三个IRAKs都有一个长的C末端结构。IRAK-4是固有免疫系统上IL-1家族和TLR(Toll样受体)家族这两大信号通路交汇的最重要的节点,在全身炎症反应中起非常重要的作用。相关研究发现,许多自身免疫疾病和肿瘤也与介导炎症的信号有关,因此IRAK-4可以作为一个有效的治疗靶点。
内源性HiBiT标记靶蛋白可用于监测细胞环境内的行为,筛选降解剂分子。HiBiT是一个由11个氨基酸构成的肽标签,与一种称为LgBiT的高亲和力互补亚基结合产生发光信号,利用 CRISPR/Cas9 技术可实现内源基因的 HiBiT 标记。降解剂分子的有效性可通过追踪HiBiT标记靶蛋白水平随时间的变化进行定量测定。如果降解剂分子促使HiBiT标记靶标被降解,则将会发现发光信号变弱。
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