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爱思益普专注于基于靶点的先导化合物筛选和优化,批量构建了新药筛选的靶点和筛选技术,致力于以高效、专业的服务,帮助新药研发企业快速有效地推进新药研发项目。在POLθ项目中我们构建了三种不同的生化方法分别用于POL θ-N ATPase抑制剂的筛选和POL θ-C polymerase抑制剂筛选,同时爱思益普可提供相关蛋白产品。
1.POL θ-N ATPase抑制剂筛选_ADP-Glo assay
2.POL θ-C polymerase抑制剂筛选_ PicoGreen方法
在此方法中,我们合成了Template和Primer,以dNTP为原料,利用POL θ-C polymerase活性合成dsDNA,用PicoGreen试剂测定化合物对POL θ-C活性的抑制能力。
3.POL θ-C polymerase抑制剂筛选_TR-FRET 方法
PicoGreen可以测定化合物对POL θ-C抑制率,但是该方法是利用PicoGreen试剂来检测dsDNA的合成,一方面Template和Primer本身就可形成dsDNA双链,本底高,窗口小,耗时长,对于操作要求高。其次PicoGreen试剂读取的是荧光强度,会受到反应体系来源荧光的干扰;最后,PicoGreen方法在dNTP类似物的抑制剂筛选过程中并不能区分具体的(dATP , dCTP, dGTP, dTTP) 类似物类型。
北京爱思益普生物科技股份有限公司专注于从靶点发现验证、先导化合物筛选、优化到临床前候选分子阶段的创新药一体化生物学服务平台,覆盖在肿瘤,免疫,心血管,中枢神经系统等疾病领域,整合蛋白科学、酶学、细胞学、体内外药物代谢动力学、药理学等平台,支持创新药物研发项目,支持基础科研与临床转化医学业务。