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传统蛋白降解检测依赖外源过表达系统，存在表达量非生理性、标签干扰蛋白功能等局限。爱思益普采用CRISPR-Cas9基因编辑技术，将HiBiT标签（仅11个氨基酸）精准敲入内源性靶蛋白基因座，构建报告基因细胞系，实现对内源性蛋白降解的实时、定量监测。
HiBiT技术的检测原理基于分裂式荧光素酶互补系统。HiBiT标签与互补肽LgBiT结合后形成完整荧光素酶，在荧光素底物存在下产生发光信号；当PROTAC分子诱导靶蛋白降解时，HiBiT标签随靶蛋白一同被清除，发光信号减弱，信号衰减程度直接反映降解效率。平台已构建STAT6 HiBiT A549细胞系、Jurkat STAT6 HiBiT-KI细胞系等，检测灵敏度达pM级别。
该技术的优势在于内源性表达背景。相比传统过表达系统，HiBiT敲入细胞系维持靶蛋白的天然启动子调控和翻译后修饰，数据更贴近生理真实。实验数据显示，同一降解剂在不同HiBiT细胞系中的效力存在差异——例如某STAT6降解剂在Jurkat细胞中的DC50为7.831 pM，在A549细胞中为74.57 pM，提示细胞背景（如E3连接酶丰度、蛋白稳态网络）对降解效率的影响。这种细胞类型依赖性数据为候选分子的优化方向提供了重要参考。
平台将HiBiT技术与高通量筛选系统整合，单日处理量超10万孔，较传统方法效率提升10倍。自动化系统可同步完成细胞铺板、化合物添加与荧光信号读取，实现从靶点验证到临床前候选分子确认的全流程支持。
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